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基因编辑动物净化之——胚胎移植
繁殖出现困难，花费时间金钱制备的小鼠传不下去了，怎么办?
动物房疑似污染，小鼠急需净化到更高级的动物房，怎么净化?
小伙伴们别担心!小编教你用胚胎移植的方法解决这个问题!
胚胎移植是目前国际上公认的最有效的生物净化方法之一。它是一项非常必要的关键技术，转基因、核移植，或体外受精等任何一项操作所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代。
一、胚胎移植
即雌鼠超数排卵后，通过体外受精((In Vitro Fertilization, IVF)技术手段获得受精卵，再将受精卵多次清洗后移植到SPF级假孕母鼠体内，得到后代经微生物检测合格，完成净化。
1.超数排卵：向供卵雌鼠腹腔注射PMSG(5IU/只)，48h后腹腔再注射HCG(5IU/只)，使其超数排卵。注射后当天与正常雄鼠同笼交配，次日检查阴道栓。
2.制备假孕雌鼠：将8周龄的雌鼠与输精管结扎的雄鼠同笼，使其交配进行假孕诱导。
3.采集受精卵：将见阴道栓的1.5d供卵鼠处死后，在显微镜下将输卵管移入培养液，小心撕开输卵管后用移卵针收集2-细胞胚胎，再移入mCZB培养液中，37℃，CO2培养箱中培养。
4.胚胎移植：麻醉假孕同期受体鼠，背中线肋骨处剪一纵切口，找到白色脂肪体并剪开，拉出卵巢、输卵管、子宫。在体式显微镜下找到输卵管伞口，用移卵针将2-细胞期胚胎从伞口位置移植至输卵管膨大部中，将卵巢、输卵管、子宫复位。一般每侧移入8-10枚胚胎，最后缝合创口，涂上青霉素和链霉素。
二、胚胎移植的应用
1.净化和快繁
SPF动物一般是经过生物净化的方式获得。净化的主要技术是：体外受精(IVF)+胚胎移植技术。将雄鼠处死后取出精子，将精子激活后与超排的卵母细胞进行体外受精拿到受精卵，再移植到SPF级代孕小鼠的子宫中，这样可以得到SPF级的小鼠后代。
快速繁育的核心是借助IVF技术短时间获得大量子代小鼠，其特点是可以减少组内小鼠周龄差异，提高实验数据的一致性。尤其是基因工程小鼠，通过IVF技术获得胚胎，再进行胚胎移植后，可一次性获得大量相同基因型小鼠。
在小鼠进入动物房前，选择IVF净化服务，在净化的同时，还能达到快速繁育的目的，同时获得更多数目的子代鼠，效率高，缩短繁育周期，极大地加快科研进度。
2.挽救雄鼠不育的品系
单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injection，ICSI)，指使用显微操作系统将单个精子注射到卵细胞胞浆内，使卵子受精，体外培养到早期胚胎，再移植到代孕小鼠体内发育成小鼠的技术。该技术用于挽救因精子无活力或者活力低造成雄性不育的小鼠品系。
3.胚胎(精子)的冷冻和复苏
胚胎(精子)冻存常用于珍贵品系的保种，通过一定的降温程序及保护措施将胚胎(精子)进行冻存，这种方法可以缓解实验小鼠空间占有率，降低成本，避免珍贵小鼠品系因外界环境、疾病等因素造成的死亡或断代损失。胚胎(精子)复苏是指通过程序化升温的方法将冻存的胚胎(精子)解冻，体外培养一段时间后移植到代孕小鼠体内，进而获得冻存品系小鼠活体的技术。其中，相比于精子冻存复苏来说，胚胎复苏后存活率高、移植后怀孕率高的优势，但其冷冻技术受限于专业机器--程序冷冻仪，建议交给专业机构来进行。
综上所述，小鼠的胚胎移植技术是制备基因修饰动物、净化、保种过程中的必需的、关键的技术手段，对于实验动物学研究及生命科学研究具有重要价值。
我们拥有10年以上屏障动物房管理与运营维护的经验，具有完善的质量管理体系，严格遵循饲养繁育和动物安全管理操作流程，严密监控屏障内环境，定期检测实验动物和环境微生物，保障实验动物健康，为您的实验数据提供更可靠的依据。
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